| 产品及特点 蜂房小甲虫（Aethina tumida）是蜂群的寄生虫。它的成虫和幼虫以蜂子、 蜂蜜和蜂花粉为食,导致幼蜂死亡、蜂蜜发酵及巢脾被破坏。小甲虫加速破坏蜂 巢,使成年蜜蜂逃逸。其损害程度可能取决于气候条件等因素,相比温度和湿度较 低的地区,蜂房小甲虫在较高的温度和高湿度下的危害一般更大。蜂蜜提纯设备 也是蜂房小甲虫潜在的繁殖场所,一旦蜂房小甲虫出现在这种设备中,这种危害 会更严重。从卵发育到成虫,蜂房小甲虫需要 3~12 周,周期长短取决于湿度、温 度和食物供应。成虫飞行时所到之处,所有规模的蜂群都会被侵扰，因此蜂房小 甲虫的快速检测具有重要的意义。本试剂盒根据 PCR 原理开发，它具有下列特 点： 1. 即开即用，用户只需要提供细菌 DNA 模板。 2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增蜂房小甲虫。 3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。 4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。 5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次。 6. 本产品只能用于科研。 规格及成分 成 份 编号 十孔盒包装 PCR MagicMix 3.0 90805 1 mL（红盖） 超纯水 100935 1 mL（亮黄盖） 蜂房小甲虫 PCR 引物混合液 13-68100yw 100 μL（白盖） 蜂房小甲虫 PCR 阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL） 13-68100pc 50 μL（黄盖） 天净沙核酸释放剂试用装 61202 20 次（1mL，绿盖） 使用手册 13-68100sc 1 份 运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。 自备试剂 样品 DNA。 使用方法 一、样品 DNA 的制备 1. 如果有 N 个样品，必须设置 N+2 个提取，多出的一个是 PC（样品制备阳 性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL 阳性对照的10000 倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作 为 PC。另外用水作为 NC。 2. 用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数寄生虫 DNA 提取试剂盒兼容。本试剂盒免费赠送 20 次免 DNA 提取的天净沙核酸释放剂， 本产品的裂解液可以直接作为 PCR 模板，省略了 DNA 提取步骤。 放剂或产品编号 61202 下载。 二、设置 PCR 反应（40 μL 体系） 3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分： 成分 N+2 个 样品管 PCR 阴性 对照 PCR 阳性 对照 PCR MagicMix 3.0 各 20 μL 20 μL 20 μL 蜂房小甲虫 PCR 引物混合液 各 2 μL 2 μL 2 μL N+2 个样品 DNA 模板 各 18 μL - - 样品制备阴性对照（超纯水） - 18 μL - 蜂房小甲虫 PCR 的 1 万倍稀释液 - - 18 μL 4. 按下表设置 PCR 反应： 过程 温度 时间 预变性 95℃ 5 min PCR 反应 （35 个循环） 95℃ 15 sec 55℃ 15 sec 72℃ 60 sec *后延伸 72℃ 10 min 三、电泳检测 5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。预期的 PCR 产物长度为 109bp。阳性对照必须有此条带出现，阴性对照必须无任何扩 增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。 关联产品 蜂房小甲虫可视化 LAMP 扩增试剂盒 原创作者：上海雅吉生物科技有限公司 |
