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大鼠骨骼肌卫星细胞说明书
一、产品简介1、产品名称：大鼠骨骼肌卫星细胞 2、组织来源：大鼠骨骼肌 3、产品规格：5×105 细胞/25cm2 培养瓶 4、细胞简介： 骨骼肌卫星细胞指骨骼肌中除骨骼肌纤维（肌细胞）外的一种扁平、有突起的细胞。其 附着于肌纤维 （肌细胞）表面；当肌纤维（肌细胞）受损后，肌卫星细胞可增殖分化，参与肌纤维（肌细胞）的修复， 因此具有干细胞性质。 本公司生产的大鼠骨骼肌卫星细胞采用酶解法制备而来，细胞总量约为5×105/T25 方瓶，细胞纯度可 达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 培养基信息： 我们推荐使用大鼠骨骼肌卫星细胞专用完全培养液（产品编号：KR5083-5）作为体外培养大鼠骨骼肌卫星 细胞的培养基。 二、使用方法 1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作： 取出T-25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2 细胞培养箱中静置4-6 小时或过夜，以稳定细胞状态，然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。 2、细胞传代： 1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2 培养瓶中的培养液，用PBS 清洗细胞一次； 2）添加0.125%胰蛋白酶消化液约2ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全 培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml 离心管中，1500rpm/min，离心 5min； 3）弃上清，沉淀细胞用12ml 完全培养基重悬，然后按1:2 比例进行分瓶传代，*后放入37℃， 5%CO2 细胞培养箱中培养； 4）待细胞完全贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。 3、细胞冻存： 1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2 培养瓶中的培养液，用PBS 清洗细胞一次； 2）添加0.125%胰蛋白酶消化液约2ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后轻轻吹打 细胞使之脱落，再加入完全培养液终止消化，然后将悬液转移至15ml 离心管中，1500rpm/min，离心 5min； 3）用适当量的冻存液（基础培养基：FBS：DMSO=7:2:1）重悬细胞，并放置于冻存管中； 4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h 后转入液氮中进行长期保存。 4、细胞复苏： 1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具）， 快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存 管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；大鼠骨骼肌卫星细胞说明书 2）将冻存管中的细胞移至15ml 无菌离心管中，滴加入完全培养液5ml 混匀细胞，然后将细胞悬液转 移至适当面积大小的培养皿中； 3）放置于37℃，5%CO2 细胞培养箱中培养； 4）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。 三、注意事项 1、培养基于4℃条件下可保存3-6 个月； 2、在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作； 3、该细胞只可用于科研；
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