Recombinant 16-Tag Protein (重组16标签蛋白)是通过大肠杆菌表达的带有His、HA、AU1、T7、E、VSV-G、V5、AU5、S、HSV、FLAG、LUMINO、GluGlu、Myc、GST和EGFP共16种常见标签的大小为68.5kD的重组蛋白,可以被16种相应的标签抗体特异性识别,常用作16种标签中的任何一种标签融合表达蛋白的Western blot检测时的阳性对照。 本产品也常被称作多标签重组蛋白(Multiple-tag recombinant protein, multi-tag recombinant protein),Western标签蛋白阳性对照(Tag protein positive control for Western blot),标签蛋白标准(Tag protein marker/Tagged protein marker)或标签蛋白对照(Tag protein control/Tagged protein control)等。 本产品带有的标签从N端开始依次为His、HA、AU1、T7、E、VSV-G、V5、AU5、S、HSV、FLAG、LUMINO、GluGlu、Myc、GST以及EGFP。GST与EGFP标签分别含有218和239个氨基酸,可从PubMed等处查询到其对应的蛋白序列,其余各标签的氨基酸序列信息见下表。 标签名称 | 氨基酸序列 | His | HHHHHH | HA | YPYDVPDYA | AU1 | DTYRYI | T7 | MASMTGGQQMG | E | GAPVPYPDPLEPR | VSV-G | YTDIEMNRLGK | V5 | GKPIPNPLLGLDST | AU5 | TDFYLK | S | KETAAAKFERQHMDS | HSV | SQPELAPEDPED | FLAG | DYKDDDDK | LUMINO | CCPGCC | GluGlu | CEEEEYMPME | Myc | EQKLISEEDL | 本产品已经配制在SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)中,浓度约为1ng/μl,室温融化后取约5μl直接上样,*后即可获得比较清晰的Western Blot检测条带。本产品经12% SDS-PAGE电泳后,使用部分标签抗体的Western Blot检测效果如图1所示。 图1. 本产品使用7种标签抗体的Western Blot检测结果图。Recombinant 16-Tag Protein上样量均为5μl,电泳结束后采用湿法电转膜,将样品转移至PVDF膜上;封闭后PVDF膜分别采用一抗产品His-tag抗体(小鼠单抗) (AH367)、HA抗体(小鼠单抗) (AH158)、AU1-tag Mouse Monoclonal Antibody (AF0051)、Flag抗体(小鼠单抗) (AF519)、Myc抗体(小鼠单抗) (AM926)、GST抗体(小鼠单抗) (AG768)与GFP抗体(小鼠单抗) (AG281)于4℃孵育过夜,洗涤后PVDF膜用辣根过氧化物酶标记山羊抗小鼠lgG(H+L)(A0216)孵育1h,一抗与二抗均使用相应稀释液按1:1000稀释后使用;*后发光检测时采用BeyoECL Star (P0018A),曝光时间为10秒。注意:使用不同的一抗、二抗和化学发光试剂,会有不同的检测灵敏度,*佳的上样量须在实际使用时适当调节。 包装清单: 产品编号 | 产品名称 | 包装 | P0059-200μl | Recombinant 16-Tag Protein | 200μl | — | 说明书 | 1份 | 保存条件: -20℃保存,一年有效。避免过多的反复冻融,可以适当分装后-20℃保存。如果希望保存更长时间,可以适当分装后-80℃保存。 注意事项: 本产品如果过多地反复冻融,可能导致蛋白降解,从而影响*终的检测效果。 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 |