产品特点产品及特点
miRNA荧光定量RT-PCR检测试剂盒用于基质辅助激光解吸离子化(Matrix Assisted LaserDesorption Ionization,MALDI)分析,所含的基质液是 MALDI 分析的必
不可少的关键成分,其主要作用一是起到分子溶剂的作用,使样品分子分开,但又不会使蛋白质发生共价修饰;而是能从激光脉冲中吸收能量,使蛋白质
发生瞬间相变,用于质谱分析
本产品的特点是:
1. 即开即用,用户不需要单独准备各种成分。
2. 经过优化,可用于各种样品的 MALDI 分析。
3. 可以选择 CCA(羟基苯丙烯酸)、DHB(2,5-二羟基苯甲酸)和 SA(芥子酸)三种不同的基质。CCA 适用于分子量在 5Kd 一下的蛋白质和多
肽分析(肽指纹图谱);DHB 适合于一般蛋白质、多肽、低聚糖、脂和合成多聚物的分析;SA 适合分子量在 3Kd-150Kd 的蛋白质分析。 规格及成分 成份
500 次包装
(CAT#:111004-500)
MS 专用溶解液 50 mL
基质液成份一 50 mg(干粉)
基质液成份二 10 mL
使用手册 1 份
运输及保存 常温运输和保存,有效期一年。 自备试剂 MilliQ 水(可选)
1、 将蛋白样品真空冻干后加入 MS 专用溶解液 100 uL,溶解半小时(期间
可以按下步配制基质液)。蛋白质的终浓度在 1-10 pmol/uL 之间。
如果是 Reverse-Phase-HPLC 制备的样品,则可以不加 MS 专用溶解液
而直接使用。注意:一定要在蛋白质样品真空冻干前将其中的缓冲液、
盐、去污剂和变性剂等去除,否则它们会严重影响蛋白质晶体的形成,
没有蛋白晶体的形成就不能进行 MALDI 分析。
2、 称量 1 mg 左右的基质干粉到一干净的 EP 管中,按每 mg CCA 加 100
uL 基质液成份二的比例加入基质液成份二,混匀后离心。注意:此是用
于结晶用的饱和溶液,可能有沉淀,故需要离心。注意:基质液新
鲜配制。本试剂盒提供 50mg,足够配 50 次 200 uL 的基质液。
3、 选用下面两种上样法上样。也可以自选其他的上样方法。
二:Dried-Droplet 法上样
1、 将 1 uL 蛋白质样品与 1 uL 新配的饱和基质液混匀。注意:可以多做几
个不同的蛋白质样品和基质液的比例,在 1:1-10:1 均可。
2、 用移液器将 1 uL 混合液点到 MS
仪器的样品靶上,让液体在室温下挥发
混合液,在未结晶之前不要摇晃。样品靶必须充分清洗干净,以免上次
试验的残留样品的干扰。
3、 如果样品中含有非挥发性杂质,在此步可以用自备的 MilliQ 水洗涤晶体
一次。
4、 将样品靶插入质谱仪内,后续操作按 MALDI-TOF
仪器使用手册进行。
5、 同样方法处理自备对照样品(一般
仪器厂家提供)。
三:Thin-Layer 法上样
1、 用移液器将 1 uL 基质液点到 MS 仪器的样品靶上,在基质液挥发前迅速
进入下一步操作。
2、 迅速用移液器将 1 uL 样品点到 MS 仪器的样品靶上,让液体在室温下挥
发干净,一般需要 5 分钟。
3、 将样品靶插入质谱仪内,后续操作按仪器使用手册进行。
4、 同样方法处理自备对照样品(一般仪器厂家提供)。
5、 同样方法处理标准品(仪器厂商提供)。
更新时间:2023/12/27 8:24:16
标签:
miRNA荧光定量RT-PCR检测试剂盒